Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы: расшифровка результатов и цена анализа

Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы – это изучение образцов тканей с помощью микроскопа. Сначала врач берет образец ткани в ходе биопсии. Затем его коллега изучает образец на стеклышке в лаборатории.

Если у пациента есть подозрение на рак молочной железы, именно иммунологическое исследование подтвердит или опровергнет эту гипотезу.

Этот сравнительно новый анализ считается одним из самых информативных при проведении дифференциальной диагностики на наличие тканей раковой опухоли.

Суть исследования

Иммуногистохимическое исследование также называют ИГХ. Метод основан на взаимодействии определенных антител с белковыми структурами и рецепторами раковых клеток.

Если в молочной железе появилась опухоль, введенные в ткань антитела присоединяются к раковым клеткам и дают свечение определенной длины волны.

Метод позволяет выявить точное расположение основной опухоли (очага) и метастазов (если таковые имеются).

Наличие или отсутствие карциномы молочной железы определяется по рецепторам двух гормонов: эстрогена и прогестерона. Также исследование определяет уровень рецепторов HER2.

HER2 – вещество, которое активирует рост белков на внешней мембране клеток эпидермиса. Если рецепторов HER2 в образце ткани больше нормы, это говорит о развитии карциномы. Суть метода сводится к тому, чтобы определить с помощью антител концентрацию рецепторов HER2, прогестерона, эстрогена и онкобелка Ki-67.

Иммуногистохимия рака молочной железы также проводится непрямым методом с помощью биотин-авидинового комплекса. Непрямой метод состоит из трех этапов:

В образец ткани, взятый при биопсии, вводятся первичные антитела. Если в ткани есть опухоль, эти антитела контактируют с антигенами раковых клеток.
Затем вводятся вторичные антитела, для которых антигенами являются первичные антитела. В итоге вторичные антитела соединяются с первичными.
Вводится комплекс, который состоит из трех субстанций: биотин, авидин и специальный фермент. Он находит вторичные антитела и соединяется с их биотином.

У непрямого метода ИГХ есть 3 преимущества:

Реакция происходит в течение всего трех часов.
Он увеличивает чувствительность определения антигенов.
На анализ нужно меньше антител.

Вне зависимости от методики исследование позволяет:

Определить тип новообразования.
Заметить злокачественную трансформацию раковых клеток.
Выявить очаг и метастазы.
Прогнозировать дальнейшее развитие опухоли.
Вовремя назначить лечение и спасти пациента.

Показания к исследованию

Этот анализ показан пациентам с подозрением на рак молочной железы или людям, которые испытывают неприятные ощущения или боль при прощупывании сосков. Иммуногистохимическое исследование помогает врачам выявить расположение опухоли. Однако если в организме появились метастазы, иммуногистохимия выявит и их.

Большое преимущество метода – отсутствие противопоказаний. Любой мужчина или женщина может сдать анализ, если переживает из-за неприятных ощущений или болей в груди.

Если опухоль выявлена на раннем этапе (когда она состоит из доброкачественных клеток), пациенту не потребуется операция или вредная для иммунитета химиотерапия. В этом случае достаточно провести курс гормональной терапии.

Положительный исход наступает в 75–80 % случаев.

Подготовка к исследованию

Обратите внимание, что никаких специальных требований к подготовке нет. Пациент может употреблять алкоголь и жирную пищу, курить или не соблюдать режим дня. Все это никак не скажется на точности результата исследования.

Как проводится анализ

Иммуногистохимия рака молочной железы по прямому методу проводится в 6 этапов:

Врач проводит трепанобиопсию молочной железы. Он берет небольшой кусочек ткани с места предполагаемой опухоли (где пациентка чувствует боль или дискомфорт).
Образец ткани направляют в лабораторию, где помещают в формалин. Это нужно для обезжиривания образца.
Затем ткань извлекают и окунают в жидкий парафин. Это первый этап в подготовке образца к исследованию под микроскопом.
Полученный блок из ткани молочной железы и застывшего парафина разрезают на тонкие кусочки толщиной до 1 мм.

Каждый полученный срез окрашивают антителами. Через определенное время лаборант исследует срез и делает заключение. Время реакции может занимать от 3 часов до 12 дней в зависимости от метода ИГХ.

Расшифровка результатов

В результате анализа указан показатель Ki-67 и статус HER2. Сначала проведем расшифровку показателя Ki-67.

Ki-67 – это белок, который используется как онкомаркер при карциноме молочной железы. Этот белок содержится в ядре клеток и в норме, но при онкозаболевании его концентрация резко возрастает. В первую очередь это касается пациентов с ER-положительным раком (повышенное содержание эстрогена в тканях молочной железы). Чем выше уровень Ki-67 в процентном отношении, тем хуже прогноз для пациента.

Расшифровка статуса HER2 более простая: он может быть положительным или отрицательным. Если статус положительный, это говорит о высоком содержании рецепторов HER2 в образце ткани. Это вызвано особым видом карциномы молочной железы, который развивается быстрее, а потому более опасный. Лечить такое заболевание нужно с помощью препаратов, действие которых направлено на белок HER2.

Также в результатах исследования могут указать статус ER и PR. Аббревиатура ER+ означает, что у пациента диагностирован рак с преобладанием рецепторов эстрогена. Точно так же маркировка PR+ говорит о раке с рецепторами прогестерона. Если после обеих аббревиатур стоит “–”, значит, в образце ткани нет карциномы молочной железы с рецепторами этих гормонов.

Итак, по итогам вышесказанного выделим две разновидности рака молочной железы:

С повышенной концентрацией рецепторов прогестерона или эстрогена (PR+ или ER+). Клетки этого подвида рака называют гормонально-положительными.
С преобладанием HER2 (HER2-положительный результат анализа).

У обоих подвидов уровень онкобелка Ki-67 в ядре или хромосомах клеток выше нормы. Рассмотрим, какое лечение назначают при тех или иных результатах ИГХ.

ER+ и PR+ рак лечат гормональной терапией. Лечение направлено на снижение соответствующего гормона в молочной железе. Такой вид заболевания лечится гораздо легче, при этом ремиссия наступает в 95 % случаев при уровне Ki-67 менее 10 %. Однако существует риск, что через несколько лет после лечения возникнет рецидив.

“Если результат анализа на HER2 составляет +3, это говорит о HER2-положительном статусе”, – сообщают лаборанты компании DILA. – Такой рак лечат препаратами, нацеленными на белок HER2. При результате +2 говорят о “двустороннем” статусе HER2 в опухоли. В этом случае нужно уточнить результат с помощью метода FISH. При показателях 0 или +1 анализ считается HER2-отрицательным”.

Есть случаи, когда результат анализа выявил HER2 +3, ER+ и PR+ одновременно. Это так называемая тройная-позитивная опухоль. В этом случае сначала назначают препарат, направленный на белок HER2. Затем в курс лечения добавляют препараты, снижающие уровень эстрогена и прогестерона.

Если результат анализа отрицателен для HER2, ER и PR, но уровень белка Ki-67 выше 10 %, диагностируют более опасный вид рака. Чаще всего он встречается у женщин из Африки и Латинской Америки. Опухоль развивается быстро и перерастает в злокачественную, поэтому здесь поможет только химиотерапия.

Прогностические факторы

По уровню Ki-67 можно сделать предварительный прогноз независимо от способа лечения пациента. Прогноз указан в таблице ниже.

Уровень содержания Ki-67, %	Прогноз выживаемости пациента, %

Иммуногистохимическое исследование

Иммуногистохимические исследования или иммуногистохимия (сокращенно ИГХ) — это анализ, который применяется для диагностики различных заболеваний и нашел особенно широкое применение в онкологии. С помощью него обнаруживают маркеры — вещества (белки), которые в больших количествах вырабатываются опухолевыми клетками. Это помогает врачам решать различные диагностические задачи.

Суть исследования ИГХ в том, что к образцу опухолевой ткани добавляют антитела, которые распознают искомое вещество как антиген и связываются с ним. Благодаря этому соответствующие участки опухолевой ткани окрашиваются, и их можно обнаружить при исследовании под микроскопом.

ИГХ — относительно простой, недорогой и в то же время очень эффективный метод диагностики, это незаменимый инструмент для врачей-онкологов при многих типах рака. Вы можете пройти иммуногистохимию в Москве в клинике Медицина 24/7.

Для чего применяют анализ ИГХ в онкологии?

Врачам-онкологам иммуногистохимия помогает решать следующие задачи:

Уточнить диагноз, вид и подвид злокачественной опухоли, если этого не позволяет сделать цитологическое и гистологическое исследование. Например, существует около 70 разновидностей лимфом и лейкозов. Чаще всего их диагностируют с помощью иммуногистохимии. Иногда дополнительно требуется проведение молекулярно-генетического исследования.
Выявить природу и локализацию основной опухоли, если удалось обнаружить только отдаленные метастазы, и неясно их происхождение.
Подобрать оптимальную схему терапии. С помощью иммуногистохимического анализа можно оценить чувствительность злокачественной опухоли к тем или иным лекарственным препаратам, обнаружить «молекулярные мишени» для противоопухолевых средств.
Оценить степень злокачественности опухолевых клеток, прогноз.
Дифференциальная диагностика: исследование помогает отличить злокачественные опухоли от доброкачественных новообразований, неопухолевых процессов.
Диагностировать множественные опухоли. Иммуногистохимию рака применяют, когда у пациента имеется подозрение на одновременное наличие двух и более разных типов злокачественных опухолей.

Как проводят анализ?

Для того чтобы провести исследование на различные опухолевые маркеры, врач должен выполнить биопсию — получить фрагмент ткани злокачественной опухоли и отправить его в лабораторию.

Там материал особым образом подготавливают (с помощью парафинизации или заморозки), обрабатывают соответствующими антителами и изучают под микроскопом.

Иммуногистохимия опухолей позволяет не только выявить искомое вещество, но и оценить его локализацию в ткани, судить о количестве.

После того как исследование завершено, лечащий врач получает из лаборатории заключение. Сроки проведения анализа установлены пунктом 24 Приказа Минздрава России № 179н от 24 марта 2016 г. Если опухолевую ткань исследуют на 5 разных маркеров или меньшее количество, результат должен быть готов в течение одной недели, если на большее количество — в течение 15 дней.

При каких типах рака чаще всего применяют иммуногистохимические исследования?

Иммуногистохимическое исследование биопсийного материала помогает выявлять разные виды опухолевых маркеров. Вот некоторые:

При раке молочной железы: рецепторы к гормонам (эстрогенам, прогестерону), белок-рецептор HER2.
При карциноидах (нейроэндокринных опухолях): рецепторы к гормону соматостатину типов 2А и 5.
При немелкоклеточном раке легкого (НМРЛ) и некоторых других типах рака: PD-L1, ROS1, ALK.
При раке толстой кишки и некоторых других злокачественных опухолях: микросателлитная нестабильность.

Иммуногистохимические исследования при раке молочной железы

При раке молочной железы самое большое значение имеют три белка: рецептор к эстрогенам, рецептор к прогестерону и HER2.

Присутствие этих молекул на поверхности раковых клеток делает их чувствительными к определенным лекарственным препаратам.

Если по результатам иммуногистохимии ни одна из этих молекул не обнаружена, диагностируют тройной негативный рак молочной железы. Он отличается более агрессивным течением, его сложнее лечить.

ER (рецептор эстрогенов) связывается с женскими половыми гормонами и стимулирует деление опухолевых клеток. У таких пациентов эффективны гормональные препараты, которые блокируют эффекты эстрогенов.
PR (рецептор прогестерона) связывается с гормоном прогестероном и приводит к аналогичному эффекту. Не существует лекарственных препаратов, которые были бы направлены против PR, однако, определение этого белка помогает правильно оценить прогноз.
HER2 — белок из семейства рецепторов эпидермального фактора роста. Если на поверхности клеток присутствует большое его количество, это стимулирует их бесконтрольные деления. Рецептор HER2 можно заблокировать с помощью таргетного препарата трастузумаба (Герцептина).

В лаборатории содержание этих веществ в опухолевых клетках оценивают с помощью специальных шкал:

ER и PR

HER2

Результаты:

0 — нет окрашенных клеток.
1+ — 1% или менее окрашенных клеток.
2+ — 1–10% окрашенных клеток.
3+ — 10% или более окрашенных клеток.

Результаты:

0 — менее 10% слабоокрашенных клеток.
1+ — слабое частичное окрашивание более чем 10% клеток.
2+ — окрашивание более чем 10% клеток, от слабого до умеренного.
3+ — сильное, полное окрашивание более 10% клеток.

Интерпретация результата:

0 — отрицательный.
1–2 — неопределенный.
3 — положительный.

Интерпретация результата:

0–1 — отрицательный.
2 — неопределенный, необходимы дополнительные анализы.
3 — положительный результат, пациент является кандидатом на лечение трастузумабом.

Иммуногистохимические исследования при раке легкого

При раке легкого с помощью иммуногистохимии можно уточнить гистологический тип злокачественной опухоли. Разные подтипы клеток при немелкоклеточном раке легкого могут экспрессировать различные маркеры:

Большинство аденокарцином (злокачественные опухоли из клеток, вырабатывающих слизь): цитокератин 7 (СК7), тиреоидный транскрипционный фактор-1 (TTF-1), опухолевый белок p63, цитокератин 20 (CK20), опухолевый белок p63, Е-кадгерин.
Плоскоклеточный рак (из плоского эпителия, который выстилает дыхательные пути): CK5/6, p63, 34bE12. TTF-1 и CK7 при плоскоклеточном раке легкого обычно не обнаруживают.

Также анализ иммуногистохимии при раке легкого может потребоваться для обнаружения продуктов «неправильных» генов, которые могут стать мишенями для таргетных препаратов. Это помогает разобраться, стоит ли назначить пациенту данные препараты:

EGFR — рецептор эпидермального фактора роста, который находится на поверхности опухолевых клеток и заставляет их бесконтрольно размножаться. В данном случае могут быть эффективны таргетные препараты: эрлотиниб (Тарцева), афатиниб (Гилотриф), гефитиниб (Иресса), осимертиниб (Тагриссо), дакомитиниб (Визимпро), нецитумумаб (Portrazza).
ALK — мутация в этом гене встречается при немелкоклеточном раке легкого примерно в 5% случаев. Применяют таргетные препараты: кризотиниб (Ксалкори), церитиниб (Зикадия), алектиниб (Алекенза), бригатиниб (Алунбриг), лорлатиниб (Лорбрена).
ROS1 — ген, мутации в котором возникают при немелкоклеточном раке легкого в 1–2% случаев. При этом помогают такие таргетные препараты, как кризотиниб (Ксалкори), церитиниб (Зикадия), лорлатиниб (Лорбрена), энтректиниб (Розлитрек).
PD-L1 — белок, который связывается с молекулой PD1 на поверхности T-лимфоцитов, подавляет их активность, мешает атаковать опухолевые клетки. Если в опухолевой ткани обнаружен этот маркер, могут быть назначены иммунопрепараты из группы ингибиторов контрольных точек.

Иммуногистохимическое исследование при раке матки

Иммуногистохимия эндометрия помогает выявить некоторые важные опухолевые маркеры:

Рецепторы к эстрогенам (ER) и прогестерону (PR): играют важную роль в прогнозе и выборе тактики лечения.
Маркеры пролиферативной активности (интенсивности деления опухолевых клеток): антиген Ki-67, ядерный антиген пролиферирующих клеток (PCNA). По пролиферативной активности опухоли можно косвенно судить о степени ее злокачественности, прорастании в соседние ткани, наличии отдаленных метастазов.
Маркеры апоптоза — запрограммированной клеточной смерти. В этом процессе принимают участие многие молекулы, если он нарушается, то клетка становится «бессмертной» и может бесконтрольно размножаться. Наибольшее значение имеют опухолевые маркеры: bax, bcl-2, c-myc, р53, с-erb B-2HER-2
eu.
Маркеры ангиогенеза — вещества, которые свидетельствуют о том, что злокачественная опухоль активно «выращивает» для себя новые кровеносные сосуды. В качестве маркеров используют антигены CD31 и CD34, VIII фактор свертывания крови.
Снижение активности гена PTEN. В норме белок, который он кодирует, должен останавливать размножение клеток и запускать апоптоз — запрограммированную клеточную смерь. При предраковых состояниях и раке эндометрия (слизистой оболочки матки) активность этого белка зачастую снижена.

Иммуногистохимические исследования при раке толстой кишки

Некоторые опухолевые маркеры, определяемые с помощью иммуногистохимии, помогают диагностировать колоректальный рак при метастазах с неизвестной локализацией первичной опухоли:

Ядерный транскрипционный фактор CDX2 высоко специфичен для клеток кишечного эпителия.
VIL1 — специфичен для аденокарцином желудочно-кишечного тракта.
GPA33 — ген, кодирующий белок, который экспрессируется в большинстве случаев при колоректальном раке.
SATB2 — белок, обладающий высокой специфичностью и являющийся хорошим маркером первичного и метастатического колоректального рака.
Другие маркеры: mCEA, CA19-9, кальретинин, COX-2, CDH17, CK20, MOC-31 (EPCAM), MUC2, CK7.

Зачастую при раке толстой и прямой кишки бывает важно определить микросателлитную нестабильность и нарушение репарации в четырех генах: MLH1, PMS2, MSH2 и MSH6.

Это помогает в оценке прогноза и диагностике синдрома Линча (наследственного неполипозного рака толстой кишки) — генетического заболевания, при котором у больного с более высокой вероятностью и в более раннем возрасте (средний возраст — 37 лет) развивается рак кишечника, некоторые другие злокачественные опухоли.

Возможны следующие результаты иммуногистохимического исследования на синдром Линча при колоректальном раке:

Все 4 белка присутствуют в опухолевой ткани: наиболее распространенная ситуация, встречается у 80% пациентов с раком толстой и прямой кишки. Среди этих больных синдром Линча встречается очень редко.
Отсутствует один или более белков: такая ситуация встречается у 20% пациентов. У них высока вероятность синдрома Линча.
Отсутствуют белки MLH1 и PMS2: такая ситуация встречается в 15% случаев. У 20% этих пациентов имеется синдром Линча.
Отсутствует только белок PMS2, MSH2 или MSH6: встречается в 5% случаев, у большинства этих пациентов имеется синдром Линча.

Иммуногистохимические исследования при меланоме

Онколог назначает иммуногистохимическое исследование, когда обнаружена меланома на любой части тела, пигментированный метастаз, который может иметь отношение к меланоме, пигментный невус (родинка), который внешне очень похож на злокачественную опухоль, но при обычном гистологическом исследовании в нем не удается обнаружить опухолевые клетки.

Исследуют маркеры:

Ki-67 — помогает оценить пролиферативную активность опухоли, прогноз.
р53 — оценка активности деления клеток.
HMB-45 — оценка функции пигментных клеток (меланоцитов).
bcl-2 — оценка вероятности того, что опухоль метастазирует.
S-100 — высокоспецифичный для меланомы маркер, который помогает отличить ее от доброкачественных образований.

Стоимость анализа в клинике Медицина 24/7

В клинике Медицина 24/7 иммуногистохимические анализы при раке и ряде других заболеваний выполняются методом флюоресцентной гибридизации in situ. Антитела, присоединившиеся к антигенам, дают при осмотре под микроскопом свечение. Цены на иммуногистохимию в нашей клинике представлены ниже.

Материал подготовлен заместителем главного врача по лечебной работе клиники «Медицина 24/7», кандидатом медицинских наук Сергеевым Петром Сергеевичем.

Источники:

Рак молочной железы — комплексный иммуногистохимический профиль — узнать цены на анализ и сдать в Москве

Метод определения гистологическое исследование с окрашиванием гематоксилином-эозином. Иммуногистохимическое исследование с применением моноклональных антител к рецепторам эстрогенов, прогестерона, c-erbB-2 онкобелку и Ki-67 (MIB-1).

Исследуемый материал биоптат опухоли желудка, опухоли молочной железы, фиксированный в забуференном 10% растворе формалина

«Золотой стандарт», комплекс гистохимических тестов, рекомендуемый для уточняющей диагностики, оценки биологического потенциала опухоли, прогноза течения заболевания, подбора индивидуальных схем терапии рака молочной железы (РМЖ).

Исследование экспрессии рецепторов эстрогенов и прогестерона

Большинство (75%) раковых опухолей молочной железы являются гормонально-зависимыми, то есть эстрогены и прогестерон оказывают стимулирующий эффект на эти опухоли. Без этих гормонов такие опухоли не могут расти, они уменьшаются в размерах и постепенно погибают.

Эстрогены и прогестерон сами по себе также играют важную роль в формировании некоторых видов РМЖ. Эстрогены являются фактором стимуляции роста и пролиферации клеток, содержащих эстрогеновые рецепторы, в органах женской половой системы и в клетках опухолей молочной железы.

Прогестерон также является фактором, способствующим возникновению онкологической патологии.

Если раковые клетки на своей поверхности имеют мало эстрогеновых рецепторов (гормонально-негативные опухоли), гормональная терапия не дает какого-либо эффекта.

Однако если при этом на клетках опухоли имеются прогестероновые рецепторы, то гормональная терапия может быть эффективной.

Следует подчеркнуть, что в том случае, когда клетки рака обладают прогестероновыми рецепторами, но не обладают эстрогеновыми, вероятность того, что гормональная терапия будет эффективной, составляет 10%.

Рецепторы эстрогенов и прогестерона стали одними из первых вошедших в практику клеточных маркеров, роль которых в генезе гормонозависимых опухолей доказана большим количеством исследований.

Определение рецепторов эстрогенов и прогестерона в ткани опухоли сейчас рассматривается как обязательное условие для успешного гормонального лечения РМЖ.

Степень реакции на гормональную терапию также существенно зависит от наличия рецепторов эстрогенов и прогестерона в опухоли: ее эффективность составляет около 10% при эстроген-негативных опухолях, примерно 50% при эстроген-позитивных опухолях и около 75% при опухолях, содержащих одновременно рецепторы эстрогенов и прогестерона. Тем не менее, известны случаи резистентности к гормональной терапии больных с эстроген- и прогестерон-позитивными опухолями, поэтому гормонально-рецепторный статус опухоли оказывается не всегда достаточным показателем гормональной чувствительности РМЖ.

Частота встречаемости гормональных рецепторов на поверхности клеток РМЖ

Около 75% всех раковых опухолей молочной железы являются эстроген-позитивными.

Около 65% из этих гормонально-позитивных опухолей имеют на поверхности и прогестероновые рецепторы (прогестерон-позитивные).
Около 25% всех раковых опухолей молочной железы являются эстроген-негативными и прогестерон-негативными или имеют неизвестный гормональный статус.
Около 10% всех раковых опухолей молочной железы являются эстроген-позитивными и прогестерон-негативными.
Около 5% всех раковых опухолей молочной железы являются эстроген-негативными и прогестерон-позитивными.

В данном контексте «позитивные» означает, что на поверхности клеток имеется значительно число рецепторов, а «негативные» — что число этих рецепторов не так велико. В некоторых случаях лаборатория может дать ответ «гормональный статус опухоли неизвестен».

HER2 статус

В настоящее время рекомендуется исследовать наличие гиперэкспрессии HER2/neu (с-erbB-2) и возможность использования HER2/neu антител для лечения РМЖ как в сочетании c химиотерапией, так и самостоятельно.

Гиперэкспрессия этого гена определяется в ткани опухоли примерно у трети больных РМЖ и ассоциируется с плохим прогнозом и малой чувствительностью к тамоксифену и химиотерапии.

Использование моноклональных антител к HER2/neu (герцептин, транстузумаб) снижает резистентность таких опухолей к определенным видам химиотерапии и значительно повышает процент пациентов, у которых удается добиться ремиссии.

Исследование экспрессии Ki-67 (пролиферативная активность)

Индекс пролиферации опухолевых клеток, который оценивают по экспрессии Ki-67, также рассматривается как прогностический фактор при РМЖ. У низкодифференцированных опухолей пролиферативная активность выше, чем у высокодифференцированных. Около 80% опухолей с гиперэкспрессией HER2/neu имеют высокую пролиферативную активность.

Сегодня принятым «золотым стандартом» диагностики при РМЖ является комплексное определение чувствительности клеток опухоли к рецепторам эстрогенов и прогестерона наряду с определением герцепт-статуса и пролиферативной активности.

Волченко Н. Н., Франк Г. А. Комплекс морфологических и прогностических факторов при раке молочной железы: Пособие для врачей.- М., 2000.
Злокачественные заболевания в России в 2011 году (заболеваемость и смертность). — Под редакцией В. И. Чиссова, В. В. Старинского, Г. В. Петровой — М.: ФГБУ «МНИОИ им. П. А. Герцена» Минздрава России. — 2013.- 289 с.
Иммуногистохимические методы: руководство. Русское издание под редакцией Г. А. Франка и П. Г.Малькова // 2011 – С.91-97
Состояние онкологической помощи населению России в 2012 году. — Под ред. А. Д. Каприна, В. В. Старинского, Г. В. Петровой. — М.: ФГБУ «МНИОИ им. П. А. Герцена» Минздрава России, 2013.- 232 с.
Almasri N.M., Al Hamad M. Immunohistochemical evaluation of human epidermal growth factor receptor 2 and estrogen and progesterone receptors in breast carcinoma//Breast Cancer Res.-2005.-Vol.7(5).-P.598-604.
Ferlay J., Shin H.R., Bray F., Forman D., Mathers C. and Parkin D.M. GLOBOCAN 2008, Cancer Incidence and Mortality Worldwide: IARC Cancer Base No. 10 [Internet]. Lyon, France: International Agency for Research on Cancer; 2010. Available from: http://globocan.iarc.fr.
Slamon D. et al. Adjuvant Trastuzumab in HER2-Positive Breast Cancer. N Engl J Med 2011; 365:1273-83.
WHO Classification of Tumors of the Braest. WHO, Lyon, 2012
Wolff A.C. et al. American Society of Clinical Oncology/ College of American Pathologists Guideline Recommendations for Human Epidermal Growth Factor Receptor 2 Testing in Breast Cancer. Arch Pathol Lab Med—Vol. 131, January 2007.

Иммуногистохимическое исследование молочной железы (er, pr, her2/neu, ki67) в %city_p%

Код 41.801. Биопс. материал

Исследование ткани молочной железы на предмет степени экспрессии генов белков, формирующих молекулярный портрет опухоли. От этих параметров зависит тактика лечения, выбор противоопухолевых препаратов и прогноз заболевания. Оценка экспрессии этих белков рекомендована ассоциацией онкологов России для лабораторной диагностики рака молочной железы.

Приём, исследование биоматериала
Показания к назначению
Описание

Приём материала

Можно сдать в отделении Гемотест
Можно сдать анализ дома

Метод исследования

Световая микроскопия гистологических препаратов Подготовка к анализу Расшифровка и референсы Сдать анализ на дому

Подозрение на рак молочной железы
Определение типа рака молочной железы
Определение стратегии лечения рака молочной железы
Оценка эффективности проводимой терапии

Иммунногистохимическое исследование представляет собой микроскопический анализ ткани, предварительно окрашенной высокоспецифичными антителами.

Антитела – молекулы, которые ультраспецифично связываются с белками клеток. Если ими окрасить ткань опухоли, краситель проявится только в участках связывания.

В данном исследовании окрашиванию подвергаются молекулы ER, PR, Her2/neu, Ki67. Немного подробнее о них:

ER (estrogen receptor): рецептор эстрогена. Эстроген – женский половой гормон. Опухоли молочной железы гормон-зависимы. Это значит, что действие гормонов определяет процесс развития опухоли и ее податливость лечению.

Около 1/3 от всех случаев опухолей молочной железы вырабатывают очень много рецепторов к эстрогену, больше молекул гормона связываются с ними и вызывают внутриклеточный ответ. Усиленное связывание эстрогена с рецепторами вызывает трансформацию здоровых клеток молочной железы в опухолевые.

У пациенток с высокой экспрессией ER хороший леченый эффект показывает заместительная гормональная терапия: в качестве лекарства используют молекулы, похожие на эстроген, но не вызывающие клеточного ответа.

Эти молекулы занимают место на рецепторе и не дают ему связаться с настоящим эстрогеном, а значит, блокирует все его эффекты, приводящие к прогрессированию рака молочной железы (РМЖ).

PR (progesterone receptor): рецептор к прогестерону. Прогестерон – еще один женский половой гормон. Он тоже вызывает прогрессирование РМЖ. Точнее, таким эффектом обладают продукты его переработки клеткой.

Его метаболиты стимулируют дополнительное деление клеток (разрастание опухоли), угнетает механизмы клеточной гибели и способствуют развитию метастазов.

Помимо этого, прогестерон стимулирует выработку большего количества рецепторов к эстрогену.

Her2/neu – рецептор эпидермального фактора роста. Связывание с фактором роста дает клетке сигнал к росту и делению. Повышенная экспрессия этого белка наблюдается примерно в 30% случаев рака молочной железы.

Выработка этого рецептора обуславливает агрессивность опухоли и неблагоприятный прогноз течения болезни. Her2/neu – мишень одного из противоопухолевых препаратов (трастузумаб).

Трастузумаб блокирует связывание рецептора с фактором роста, опухолевая клетка не получает сигнала к выживанию и росту и развитие рака молочной железы замедляется или вовсе прекращается.

Ki67 – белок клеточного ядра, ассоциированный с клеточным делением. Чем чаще делятся клетки, тем больше вырабатывается этого белка и тем быстрее растет опухоль.

Этот белок не используется в качестве мишени для лекарств, но его количество – показатель интенсивности развития опухоли и скорости ее роста.

Степень экспрессии этого белка помогает прогнозировать течение болезни и оценить агрессивность опухоли.

Особенности и преимущества методики

Cветовая микроскопия гистологических препаратов обработывается маркированными специфическими антителами

Что ещё назначают с этим исследованием?

Использованная литература

Колядина И. В., Поддубная И. В., Франк Г. А., Комов Д. В., Ожерельев А. С., Карселадзе А. И., Ермилова В. Д., Вишневская Я. В., Макаренко Н. П., Керимов Р. А., Тетерин К. А., Банов С. М. Прогностическое значение рецепторного статуса опухоли при раннем раке молочной железы // Соврем. технол. мед.. 2012. №4)
Прокопьева Т. А.

, Горбунова Е. Е. Заместительная гормональная терапия и рак молочной железы // ПМ. 2011. №54. обращения: 11.09.2020).
Ассоциация онкологов России Клинические рекомендации Рак молочной железы 2018

Формат представления результатов имеет описательный характер с установлением гистологического диагноза соответствующего МКБ-10

Нормой считается отсутствие клеточных изменений.

ЦЕНА ИССЛЕДОВАНИЯ
8 000 Р
ИТОГОВАЯ ЦЕНА
8 000 Р

Цена исследования

8 000 Р

8 000 Р Добавить в корзину Добавить в корзину

Нмиц онкологии им. н.н. блохина — игх

Иммуногистохимия является дополнительным методом исследования, применяемым в патологической анатомии при диагностике доброкачественных и злокачественных новообразований, когда постановка диагноза по гистологическим препаратам не представляется возможной или требуется уточнение клинически важных молекулярных параметров опухоли.

Данная методика основана на выявлении в анализируемом образце ткани белков, специфичных для того или иного вида клеток, что позволяет отличать один вид опухоли от другого, а также выявлять маркеры, отвечающие за лекарственную чувствительность опухолевой ткани.

Зачем нужна иммуногистохимия, если уже сделано гистологическое исследование?

В ряде случаев проведения обычного гистологического исследования биопсии бывает недостаточно, что объясняется следующими причинами:

опухоль имеет крайне неспецифичное микроскопическое строение, которое не позволяет поставить окончательный диагноз.

Например, диагноз практически всех лимфом и лейкозов (более 70 видов!) ставится после ИГХ исследования, а в части случаев дополнительно требуется молекулярно-генетическое исследование; в свою очередь, за гистологическим диагнозом «мелкокруглоклеточная опухоль» может скрываться до 13 различных злокачественных опухолей, каждая из которых имеет свой прогноз и требует индивидуального плана химиолучевого лечения – единственным методом, способным помочь врачу в дифференцировании этой группы опухолей, является ИГХ исследование.

Сроки выполнения ИГХ исследования

В соответствии с п.24 Приказа №179н от 24.03.2016 г. Минздрава России, срок выполнения ИГХ исследования:

с использованием до 5 маркеров включительно – не более 7 рабочих дней,
с использованием более 5 маркеров – не более 15 рабочих дней.

Возможности ИГХ исследования

1. Диагностика:

окончательное (реже промежуточное) установление диагноза опухолевого процесса (различные варианты рака, саркомы мягких тканей, меланома, типирование лимфом и лейкозов),
уточнение степени злокачественности опухоли (напр., нейроэндокринной опухоли), что будет определять прогноз заболевания,
дифференциальная диагностика опухолей и неопухолевых процессов,
определение органной принадлежности метастаза с неизвестной первичной локализацией (применимо не для всех опухолей!),
дифференцирование множественных опухолевых процессов (наличие у пациента 2 и более разных опухолей).

рецепторы стероидных гормонов (рецепторы эстрогенов, рецепторы прогестерона, рецепторы андрогенов) – рак молочной железы, рак тела матки (эндометрия), другие опухоли;
белок Her2/neu — рак молочной железы, рак желудка, рак мочевого пузыря;
рецепторы соматостатина 2А и 5 типов – нейроэндокринные опухоли (карциноиды);
PD-L1 – немелкоклеточный рак легкого, беспигментная меланома, другие опухоли;
ALK — немелкоклеточный рак легкого;
ROS1 — немелкоклеточный рак легкого;
микросателлитная нестабильность (MSI) – рак толстой кишки, другие опухоли;
индекс пролиферативной активности (Ki-67) – различные виды злокачественных опухолей.

Пациенты, не находящиеся на госпитализации в стационарах НМИЦ онкологии, могут узнать о стоимости ИГХ исследования в регистратуре патологоанатомического отделения (4 этаж, каб. №12).

Если у меня есть полис ОМС, должен ли я платить за иммуногистохимическое исследование?

Для всех пациентов, находящихся на госпитализации в стационарах НМИЦ онкологии и получающих медицинскую помощью по ОМС или ВМП (высокотехнологичная медицинская помощью), ИГХ исследование выполняется бесплатно. Необходимым условием выполнения бесплатного исследования является нахождение пациента на госпитализации в стационаре на момент оформления ИГХ.

Во всех остальных случаях ИГХ исследование выполняется за счет личных средств пациента.

За более подробной информацией рекомендуем обращаться в вашу страховую компанию.

Игх опухоли молочной железы

Полное название анализа: Игх опухоли молочной железы (PR/ER/Кi67/Her2 neu)
Биоматериал: ткань мягкотканной опухоли
Время выполнения: 11-13 дня

Комплекс «Золотой стандарт» — это ряд гистохимических тестов, применяемых для уточняющей диагностики, определения биологического потенциала онкологического новообразования, прогноза течения заболевания, подбора индивидуальных схем эффективного лечения рака молочной железы (РМЖ).

Исследование экспрессии рецепторов эстрогенов и прогестерона.

Подавляющее большинство раковых новообразований (75%) имеют гормонально-зависимую природу. Стимулирующий эффект на опухоль оказывается прогестероном и эстрогенами.

Если данные гормоны отсутствуют, то опухоли попросту не способны разрастаться, а погибают еще на стадии формирования.

При этом, и прогестерон и эстрогены играют существенную роль при формировании ряда видов онкологии молочной железы.

Эстрогены – это факторы активации пролиферации и роста клеток, в которых содержатся эстрогеновые типы рецепторов, в органах женской гинекологической системы и опухолевых клетках молочной железы.

Прогестерон – также представляет собой способствующий формированию онкологической патологии фактор.

В случае, когда на поверхности раковых клеток сниженная численность эстрогеновых рецепторов (опухоли гормонально-негативного типа), применение гормональной терапии какого-либо эффекта не дает.

Но если при этом на опухолевых клетках присутствуют прогестероновые рецепторы, то использование гормональной терапии может дать позитивный результат.

Нужно отметить, что в случае, когда раковые клетки имеют прогестероновые рецепторы, но нет эстрогеновых, возможность того, что гормональное лечение будет успешней приблизительно на 10%.

Рецепторы прогестерона и эстрогенов – это первые клеточные маркеры, вошедшие в практику, роль которых в генезе гормонозависимых новообразований доказана массой проведенных исследований. Выявление рецепторов прогестерона и эстрогена в опухолевой ткани на данный момент рассматривается в качестве обязательного условия для проведения успешной гормонотерапии рака молочной железы.

Также от наличия прогестероновых и эстрогенных рецепторов зависит и степень реактивности на применяемую гормональную терапию для лечения опухоли: эффективность при эстроген-негативных новообразованиях составляет приблизительно 10%, при эстроген-позитивных опухолях приблизительно 50%, и около 75% при новообразованиях, в которых присутствуют рецепторы как эстрогенов, так и прогестерона. Но при этом, в медицинской практике наблюдаются случаи устойчивости (резистентности) к применяемой гормональной терапии у пациентов с прогестерон- и эстроген-позитивными новообразованиями, по этой причине гормонально-рецепторный статус онкологического образования не всегда представляет собой достаточный показатель гормональной чувствительности онкологии (рака) молочной железы.

Частота встречаемости гормональных рецепторов на поверхности клеток РМЖ:

Приблизительно 75% всех раковых новообразований молочной железы эстроген-позитивны (ЭР+).
Приблизительно 65% эстроген-позитивных опухолей обладают такими же рецепторами к прогестерону (ЭР+/ПР+).
Приблизительно 25% всех раковых новообразований молочной железы эстроген-прогестерон-негативны (ЭР-/ПР-), либо неизвестен их гормональный статус.
Приблизительно 10% всех раковых новообразований молочной железы эстроген-позитивны и при этом прогестерон-негативны (ЭР+/ПР-).
Приблизительно 5% всех раковых новообразований молочной железы эстроген-негативны и при этом прогестерон-позитивны (ЭР-/ПР+).

В приведенных данных термин «позитивные» означает, что на клеточной поверхности присутствует существенная численность рецепторов, «негативные» — означает малое количество рецепторов. В ряде случаев независимая лаборатория возможно выдаст ответ такого типа: «гормональный статус опухоли неизвестен».

HER 2 статус

На сегодняшний день специалисты рекомендуют исследовать присутствие гиперэкспрессии HER2/neu(с-erbB-2) и возможность применения HER2/neu антител для терапии рака молочной железы самостоятельно или в комплексе c химиотерапией.

Гиперэкспрессия данного гена определяется в опухолевой ткани приблизительно у трети пациентов с РМЖ и проводится ассоциация с крайне неблагоприятным прогнозом и низкой степенью чувствительности к химиотерапии и тамоксифену.

Применение моноклональных антител к HER2/neu (герцептин, трастузумаб) понижает резистентность (устойчивость) таких новообразований к определенным видам химиотерапии и существенно повышает в процентном соотношении количество пациентов, у которых удалось достигнуть ремиссии.

Исследование экспрессии Ki-67 (пролиферативная активность).

Индекс пролиферации клеток опухоли, оценивающий по экспрессии Ki-67, тоже изучается в качестве прогностического фактора при раке молочной железы. У новообразований низкодифференцированного типа пролиферативная активность повышена, чем у высокодифференцированных. Приблизительно 80% новообразований с гиперэкспрессией HER2/neu обладают высокой пролиферативной активностью.

На сегодняшний день общепринятым «золотым стандартом» диагностирования рака молочной железы является комплексное выявление чувствительности клеток опухоли к рецепторам прогестерона и эстрогенов с определением пролиферативной активности и герцепт-статуса.

Особые условия подготовки определяются лечащим врачом. Что касается иных требований, то необходимо придерживаться простых правил:

пациент должен находиться в состоянии полного покоя 30 минут;
следует отказаться от курения и употребления алкогольных напитков.

При приеме каких-бы ни было лекарственных препаратов, есть смысл проконсультироваться с лечащим врачом о целесообразности проведения тестов или правильно подойти к вопросу отмены применяемого средства.

с целью гистологического исследования биоптатов молочной железы (путем окрашивания гематоксилином-эозином);
с целью иммуногистохимического исследования экспрессии рецепторов прогестерона и эстрогенов (пероксидазно-антипероксидазный и авидин-биотиновый методы);
с целью иммуногистохимического исследования экспрессии HER2 (пероксидазно-антипероксидазный и авидин-биотиновый методы);
с целью иммуногистохимического исследования экспрессии Ki-67 (пероксидазно-антипероксидазный и авидин-биотиновый методы);

Показания к назначению: рак молочной железы, для прогнозирующей оценки и подбора адекватного лечения.

Иммуногистохимический (ИГХ) метод исследования дает возможность определять и оценивать молекулярно-биологические факторы, влияющие на прогноз и выбор лекарственного воздействия на рак молочной железы.

К данным факторам относят экспрессию в клетках опухолевой ткани рецепторов стероидных гормонов: ядерного антигена Ki–67 (показатель пролиферативной активности), прогестерона и эстрогена, онкопротеина HER2/neu(c-erbB-2).

Важно понимать, что интерпретация данных исследований является прерогативой лечащего врача. Категорически нельзя использовать полученную информацию для самодиагностики и самостоятельного лечения. Специалист ставит точный диагноз, основываясь как на данные теста, так и за счет сбора информации от пациента, пользуясь другими источниками, исследованиями, анамнезом и т. д.

Форма предоставления результата: ответ описательный с отражением численности Н-баллов клеток, количества баллов определения гиперэкспрессии HER2, экспрессирующих рецепторов прогестерона и эстрогена, процента пролиферирующих клеток:

Морфологическое определение новообразования молочной железы, в соответствии с классификацией ВОЗ (2012).
Экспрессия рецепторов прогестерона и эстрогенов. Для определения экспрессии рецепторов прогестерона и эстрогенов производится подсчет численности окрашенных визуализирующим агентом ядер опухолевых клеток. Подсчет иммуноположительных клеток производится в зонах с максимальным проявлением диаминобензидина при анализе не менее 300 клеток. Для определения ИГХ данных экспрессии прогестерона и эстрогенов применяется балльная шкала, учитывающая процент окрашенных клеток и степень выраженности экспрессии. Интенсивность окрашивания — баллы IS:
- нет окрашивания — 0;
- слабо интенсивное окрашивание — 1ISxNx;
- умеренно интенсивное окрашивание — 2ISxNx;
- сильно интенсивное окрашивание — 3ISxNx.
Определение общего балла H: H= 1ISxNx+ 2ISxNx+ 3ISxNx, где N— число положительных ядер.
Экспрессия с-erbB-2. Иммуногистохимическое исследование HER2-статуса оценивается балльной шкалой с оценками 0, 1+, 2+, 3+. 4.
Индекс пролиферации Ki-67. Производится подсчет численности окрашенных визуализирующим агентом ядер клеток опухоли, учитывающих процентное соотношение неокрашенных/окрашенных клеточных ядер на 100 учтенных клеток в 10 репрезентативных полях зрения при возрастании х40.

Референсные значения и интерпретация:

Спектр значений строго индивидуален, имеет значение установленный клинический диагноз, собранный анамнез, уже проведенное лечение и иные факторы.

Иммуногистохимические исследования тканей, полученных при трепан-биопсии молочной железы | Университетская клиника

Многие злокачественные опухоли груди успешно лечатся гормонами. Однако для этого нужно знать их гормональный статус – количество особых структур – рецепторов, реагирующих на гормоны прогестерон и эстрогены – PR и ER. Если показатели анализа будут высоки, женщине назначают гормональную терапию.

Во время иммуногистохимической диагностики выясняют количество рецепторов к человеческому эпидермальному фактору роста HER2/neu, запускающему клеточное деление. Высокие показатели HER2, характерны для агрессивных опухолей, которые быстро растут, делятся и дают метастазы.

Это исследование позволяет подобрать препараты для лечения онкологии. В последние годы рак лечат с помощью таргетных лекарств, воздействующих только на злокачественные клетки и минимально влияющих на остальной организм. Их подбор осуществляется в зависимости от показателя HER2/neu. При низких значениях таргетные препараты неэффективны.

Быстроту клеточного деления – пролиферативную активность выявляет анализ на белок Ki-67. Это вещество появляется только в процессе клеточного деления, поэтому его высокий показатель говорит об агрессивности рака.

Для проведения таких исследований на срез опухоли наносятся вещества – антигены, содержащие краситель. Эти вещества вступают в реакцию с рецепторами или белком Ki-67. В результате окрашиваются сами злокачественные клетки или их жидкая часть – цитоплазма. После этого с помощью специальной аппаратуры измеряют количество окрашенных клеток и определяют степень их окраски:

В зависимости от количества окрашенных клеток, образцу присваивается номер от 0 до 5. Чем он выше, тем большее количество злокачественных элементов окрасилось.
Интенсивность окраски определяется значениями от 0 до 3. Более высокий показатель указывает на интенсивное изменение цвета.

Затем обе цифры складывают и оценивают итоговую сумму.

Результаты анализа на ER, PR, HER2/neu

Уровень ER, PR, HER2/neu	Характеристика показателя
0-2	Отрицательный
3-6	Умеренный
7-8	Высокий

Низкий показатель указывает на низкую чувствительность опухоли к гормонам и таргетным препаратам. В этом случае нужны другие методы лечения. Высокий показатель указывает на эффективность гормональной и таргетной терапии.

Результаты анализа на белок Ki-67

Уровень,%	Характеристика
15	Низкий – опухоль имеет малую агрессивность
16-30	Средний – опухоль имеет среднюю агрессивность
Свыше 30	Высокий – агрессивное новообразование

От правильной сдачи иммуногистохимического анализа зависит успех лечения, поэтому такое исследование при онкологии очень важно.
Продолжение статьи