Показатель ki 67 при раке молочной железы: норма, значение уровня экспрессии и прогнозы

Белок Ki-67 — самый широко используемый маркер пролиферации как в нормальных, так и в опухолевых клетках. Впервые описан в 1983 году в Институте патологии в немецком городе Киль, где и были синтезированы первые антитела к нему в 67 лунке планшета [1]. 

Негистоновый белок Ki-67 кодируется геном MKI67. Он участвует в клеточном цикле, вовлекаясь в биогенез рибосом, организацию гетерохроматина и разделение митотических хромосом.

Полный спектр его функций все еще неясен.

Трудности исследования Ki-67 связаны с отсутствием гомологичных белков с уже известной функцией, а также с его большой молекулярной массой и высокой чувствительностью к разрушению протеазами [2].

Ki-67 обнаруживается в ядрах клеток во все активные фазы клеточного цикла: G1, S, G2, M. Ki-67 весьма «ветреный» белок: его распределение и количество вариабельно и зависит от конкретного момента жизни клетки (рис. 1) [3].

От фазы G1 к фазе М его количество увеличивается, достигая максимума во время метафазы митоза. В самом начале фазы G1 локализация Ki-67 совпадает с локализацией сателлитной ДНК в центромерах и теломерах хромосом. Далее при прогрессии фазы G1 эта колокализация исчезает.

К середине фазы G1 белок Ki-67 начинает выявляться в ядрышках, затем, в фазу G2, — и в ядрышках, и в кариоплазме. .

Рисунок 1. Локализация Ki-67 на протяжении всего клеточного цикла Антитела к Ki67 (зеленый) и DAPI для визуализации ДНК (синий). В фазу митоза Ki-67 покрывает конденсированные хромосомы в качестве основы перихромосомного слоя. Когда клетки вступают в раннюю фазу G1, маленькие точечные структуры Ki-67 покидают деконденсированные хромосомы. Затем в ходе G1-фазы Ki-67 перемещается на периферию ядрышка, покрывая перинуклеолярный гетерохроматин [3].

Но все меняется, когда происходит митоз. В профазу Ki-67 в виде тонкой сети связан с конденсированным хроматином. В метафазу эта сетчатая структура окружает уже отдельные хромосомы. После разрушения ядерной мембраны часть Ki-67 распределяется диффузно в цитоплазме. В анафазу и телофазу митоза количество Ki-67 в клетках начинает быстро снижаться.

При переходе клетки после митоза в фазу G0 Ki-67 быстро подвергается катаболизму (путем опосредованной протеасомами деградации) и перестает выявляться в ядрах интерфазных клеток [4].

Ki-67 также обнаруживается при гиперэкспрессии p53 и p21, вызванной блокированием репликации или повреждением ДНК [2].Длительное время Ki-67 определялся как иммуногистохимический маркер, отражающий лишь активность пролиферации.

Это обусловило его важную роль в классификации злокачественных новообразований, таких как рак молочной железы, нейроэндокринные опухоли и лимфомы [5].

Определение индекса Ki-67 является более чувствительным методом для оценки пролиферативной активности, чем подсчет фигур митоза, поскольку позволяет выявлять клетки во всех активных фазах клеточного цикла и уменьшает вероятность неверной интерпретации микроскопической картины.

Переход патоморфологов в своей рутинной практике к расчету индекса пролиферации по уровню Ki-67 стал начальным этапом движения в сторону стандартизации и объективизации гистологических исследований. От двоичной системы «есть экспрессия» (1) / «нет экспрессии» (0) фокус сместился к оценке степени выраженности маркера в исследуемых образцах.

Индекс пролиферации — это процент клеток с ядерным окрашиванием от общего числа опухолевых клеток. Интенсивность и тип экспрессии маркера не учитывается (перинуклеолярный, нуклеоплазменный, перихромосомный).

Подсчет включает в себя не менее 500 опухолевых клеток (в идеале не менее 1000) не менее чем в 3 полях зрения при увеличении ×400.

В случае гетерогенности опухоли выбирают участки с наибольшей митотической активностью [6].

Общие характеристики уровня пролиферации для опухолевой ткани различных локализаций:

1. < 10 % — низкий уровень;
2. 10–20 % — пограничные опухоли;
3. > 20 % — высокий.

В лабораториях используют антитела к Ki-67 клонов MIB-1 (для работы с материалом, полученным от человека, крупного рогатого скота, собак, овец и лошадей) и MIB-5 (для работы с материалом, полученным от крыс и других грызунов). Эти структуры показали более высокое сродство к эпитопу антигена Ki-67 в условиях формалиновой фиксации доставляемого материала [2].

Особую значимость этот маркер приобрел при патоморфологическом исследовании опухолей молочной железы. Гистологический подтип гормон-позитивных люминальных опухолей определяется на основании индекса Ki-67: подтип А (Ki-67 < 20 %) и подтип В (Ki-67 ≥ 20 %) (рис. 2) [6]..

Рисунок 2. Активность пролиферации в образцах рака молочной железы Опухоли с индексом Ki-67 < 10 %, 10–20 % и > 20 % соответственно [6].

Прогностические горизонты применения маркера Ki-67 постоянно расширяются. Уточняется и дополняется его значение в предикции результатов лекарственной терапии опухолей.

Например, для рака молочной железы, который не отвечает на химиотерапию, повышение Ki-67 является плохим прогностическим маркером.

Напротив, в опухолях, реагирующих на химиотерапию, этот эффект не наблюдается, и даже присутствует корреляция увеличения Ki-67 с улучшением прогноза. 

Объяснение этому феномену можно логически вывести из понимания биологии каждого подтипа опухоли:

1. Низко пролиферирующие опухоли хуже реагируют на химиотерапию, но в любом случае имеют хороший прогноз ввиду меньшей агрессивности (низкий Ki-67 — хороший результат).
2. В тех высокопролиферирующих опухолях, которые чувствительны к терапии, высокий Ki-67 связан с большей частотой достижения полного патоморфологического ответа (pCR) и улучшением выживаемости (высокий Ki-67 — хороший результат).
3. Но в высокопролиферирующих опухолях, которые при этом также являются резистентными к химиотерапии, увеличение индекса Ki-67 связано с уменьшением выживаемости: активно пролиферирующие клетки обусловливают агрессивное поведение опухоли, не контролируемое химиопрепаратами (высокий Ki-67 — плохой результат) [6].

В настоящее время методы иммуногистохимической детекции Ki-67 представляются в виде несколько упрощенной картины, как будто Ki-67 «включен» во время клеточной пролиферации (характерное коричневое окрашивание ядер) и «выключен» во время покоя и старения клетки (нет окрашенных ядер, может обнаруживаться в цитоплазме).

Но важное клиническое значение может иметь также интерпретация факта неуклонного роста экспрессии Ki67 от фазы G1 к фазе М. Также выяснено, что чем дольше клетка находится в состоянии покоя, тем ниже будет уровень Ki-67 при повторном входе в клеточный цикл [5,7].

Для анализа этих данных требуются методы системной биологии с выведением формулы, позволяющей учесть все характеристики Ki-67 в доставленном материале. Это позволит более точно отразить пролиферативный статус клеток и определить клиническую стратегию. Ключевым моментом эффективности таких многофакторных алгоритмов является, несомненно, точность «сырых» данных.

И здесь мы уже говорим о стандартизации патоморфологического исследования, которое в современной практике должно базироваться на цифровой обработке гистологических изображений.

Источники:

1. Gerdes J., Schwab U., Lemke H., Stein H. Production of a mouse monoclonal antibody reactive with a human nuclear antigen associated with cell proliferation. Int J Cancer. 1983;31(1):13-20.
2. Sun X., Kaufman P.D. Ki-67: more than a proliferation marker. Chromosoma. 2018;127(2):175–186.
3. Matheson T.D., Kaufman P.D. The p150N domain of chromatin assembly factor-1 regulates Ki-67 accumulation on the mitotic perichromosomal layer. Mol Biol Cell. 2017;28(1):21–29.
4. Kreipe H. [Ki67: biological intertumor variance versus variance of assay].Pathologe. 2018;39(Suppl 2):272-277.
5. Cidado J.et al. Ki-67 is required for maintenance of cancer stem cells but not cell proliferation. Oncotarget. 2016;7(5):6281–6293.
6. Denkert C. et al. Strategies for developing Ki67 as a useful biomarker in breast cancer. Breast.2015;24 Suppl 2:S67-72.
7. Miller I.et al. Ki67 is a Graded Rather than a Binary Marker of Proliferation versus Quiescence. Cell Rep. 2018;24(5):1105–1112.e5.

Ki-67 при раке молочной железы: норма индекса и прогноз

Для верного лечения рака молочной железы необходимо провести множество тестов и анализов, среди которых определение индекса Ki-67. Этот маркер чрезвычайно важен, он позволит составить верный план лечения и определить, как развивается опухоль. Что нужно знать об этом маркере? Как проводится тест? Каковы прогнозы?

Значение

Под Ki67 подразумевается антиген раковой опухоли. Его можно увидеть в клетке при ее делении, но если она находится в фазе покоя, то обнаружить этот антиген невозможно. Благодаря этому маркеру можно прогнозировать поведение раковой опухоли. Тест берется с помощью биопсии или оперативным путем, проводится на образце ткани.

Какова роль маркера

Тест на этот вид маркера проводится не только для рака груди, но и для других злокачественных опухолей. Но в большинстве случаев, именно на рак молочной железы приходится основной процент проведённых тестов с Ki-67.

Если уровень антигена высокий, то прогнозы неутешительные и опухоль прогрессирует. Если процент Ki-67 большой, то вероятность рецидива увеличивается.

Причем независимо от того, как реагирует новообразование на гормональное лечение.

Если после проведенного лечения заболевание снова дает о себе знать и при этом маркер еще выше, то это говорит о том, что нужно комбинировать несколько методов противораковой терапии.

Когда нужно проводить тест

Если онкология агрессивная, то врач назначает тест для того, чтобы убедиться влияет ли уровень антигена на развитие опухоли. Также сдается ряд и других тестов, например на наличие рецептора HER2 — Neu. Данные, полученные со всех тестов дадут основу для составления плана лечения.

Если опухоль растет быстро, меняется, это может служить основанием для проведения теста. Ведь индекс указывает на количество клеток в стадии деления, а чем больше их делится, тем больше становится.

Как делается анализ

Для того чтобы сдать анализ не нужно какой-то специальной подготовки или условий проведения. Берется часть пораженной ткани и окрашивается. Это позволит определить процент клеток, находящихся или готовящихся к делению. Чем больше клеток в стадии деления, тем еще больше их будет.

Методы анализа:

• Результат окрашивания оценивается с помощью световых микроскопов.
• Процент определяется соотношением окрашенных клеток ко всем остальным, при этом интенсивность окраски не имеет никакого значения.
• Метод на 15% был изучен врачами патологоанатом, также применяются рекомендации международных медицинских учреждений.
• Тест проводится с учетом раздела всей опухоли.

Итоги теста определяются процентом, если он равен 0%, то не одна из клеток рака не находится в стадии деления, а значит опухоль развивается очень медленно.

Если индекс равен 100%, то значит, что все клетки в стадии пролиферации (деления) и опухоль прогрессирует быстро. Если меньше 20% , опухоль растет медленно, все что больше 20% , быстрорастущая онкология.

 Индекс также используется для оценки эффективности лечения, если оно удачное, то уровень понижается.

Пролиферативный индекс и его польза

Ki 67 , маркер, который является хорошим показателем нахождения клетки в стадии деления (пролиферации). Именно поэтому индекс называют пролиферативным. Уровень маркера означает соотношение клеток, находящихся в стадии деления ко всем остальным. Зная уровень индекса можно сделать довольно точный прогноз выживаемости.

Если уровень индекса высок, то есть делящихся клеток много, то такой рак хорошо подается химиотерапии. Это связано с тем, что препараты химиотерапии убивают только те клетки, которые находятся в стадии пролиферации, а значит и эффективность их высока. Зная индекс, медики смогут подобрать наиболее эффективный план лечения злокачественной опухоли груди.

Спорные вопросы

Ki-67 маркер при раке молочной железы имеет две стороны медали. С одной стороны, если индекс высокий, то прогноз неутешительный, но зато химиотерапия здесь будет точно эффективна.

Другой спорный вопрос об этом тесте заключается в том, будет ли он полезен при определении необходимости адъювантной химиотерапии.

Если результат теста плохой

Зная, что высокий уровень маркера означает плохой прогноз, у пациентки может появиться серьезное чувство тревоги за собственное здоровье. Но не стоит отчаиваться, ведь медицина имеет множество методов лечения рака даже на самых последних стадиях. И знать результаты анализов необходимо, пусть даже они неутешительные, это позволит назначить адекватное лечение.

Чтобы не падать духом, стоит искать поддержку в семье, также не лишним будет общение с женщинами, больными раком груди. Общение может быть как живым, так и через интернет, это позволит не оставаться со своей проблемой наедине, также можно получить много полезной информации.

Стоит знать и некоторую статистику выживаемости:

• При индексе меньше 10% выживаемость , 95%.
• Если индекс выше 10% выживаемость – 85%.

Вывод: при уровне антигена, приближающемся к 100%, шансов на выживание очень мало. Однако даже на такой стадии рак подвергается лечению. С помощью показаний маркера врач определит точно, как прогрессирует болезнь и найдет наиболее качественный способ лечения. Помните, надежду нельзя терять никогда. Шанс на исцеление есть всегда!

Игх при раке молочной железы: исследование игх при онкологии молочной железы, типы рака молочной железы по игх

ИГХ при раке молочной железы — необходимость современной онкологии. Его результаты позволяют подобрать максимально подходящее женщине противоопухолевое лечение.

Что такое иммуногистохимия при РМЖ?

Иммуногистохимический анализ или коротко ИГХ основан на способности иммунитета синтезировать вещества, нейтрализующие инородные агенты — бактерии, вирусы, грибы и выделяемые ими токсины. Инородные агенты — это антигены, в их присутствии иммунные клетки вырабатывают определённое антитело, на каждое антитело имеется свой антиген.

• Рак молочной железы умело скрывается от санкций иммунитета, тем не менее раковые клетки и их структурные элементы — антитела, иммунитет их не видит, но ИГХ выявляет эти антитела.
• При ИГХ кусочек опухоли обрабатывают реагентами с антигенами, которые находят своё антитело и соединяются с ним, изменяя окраску исследуемого кусочка злокачественной ткани.

Для чего проводят иммуногистохимию при РМЖ?

Иммуногистохимия нужна не для научной работы, а для практического использования:

1. Обнаружение в клетках рецептора половых гормонов, чувствительного к эстрогену (ЭР) или прогестерону (ПР), прогнозирует чуть более плавное течение рака с меньшей вероятностью метастазирования, с преимущественной локализацией метастазов в костях, большую продолжительность жизни даже при генерализации процесса;
2. Разная концентрация ЭР и ПР позволяет выбрать для конкретной женщины оптимальное лечение, так при высоком уровне ЭР в сочетании с ПР и даже без них можно рассчитывать на хороший результат гормональной терапии, без рецепторов обязательна химиотерапия;
3. Наличие в клетке НЕR2 в высокой концентрации указывает на агрессивность рака, что требует химиотерапии и специфического нейтрализатора НЕR2;
4. Сочетание позитивного гормонального статуса с НЕR2 вызывает сомнения в результативности гормонотерапии, поэтому в программу лечения включается химиотерапия;
5. Высокая концентрация Ki-67 — свидетельство высокой степени злокачественности и, опять-таки, не позволяет избежать химиотерапии.

Показания к иммуногистохимии при РМЖ

При раке молочной железы для ИГХ только одно показания — определение степени агрессивности рака по его структурным компонентам для подбора оптимальной программы лечения.

Обычный морфологический анализ — гистология показывает степень злокачественности опухоли и её клеточный состав, часто неоднородный, но не позволяет определить белковые структуры:

• Чувствительность каждой клетки к лекарствам определяется наличием у нее рецепторов половых гормонов;
• Активность клеточного размножение и скорость роста ракового узла контролирует белок НЕR2, если его слишком много, то рак будет расти быстрее и формировать защиту клетки от лекарств вплоть до полной устойчивости;
• Способность быстро воспроизводить замену погибшим клеткам, захватывая при этом новые территории, определяет маркер пролиферации Ki-67.

Концентрацию всех этих клеточный субстанций и определяет ИГХ.

Подготовка к исследованию

ИГХ при раке молочной железы проводится вне организма больной, но с кусочком её опухоли. Сегодня всем женщинам с впервые обнаруженным новообразованием в железе на этапе диагностики специальной иглой выполняется биопсия — кор-биопсия.

Взятый небольшой столбик раковой ткани подвергается гистологическому исследованию и ИГХ, что позволяет верифицировать, то есть доказать наличие рака, и планировать первичное лечение. Удалённую во время операции на молочной железе опухоль тоже подвергают гистологическому и ИГХ исследованиям для уточнения плана лечения.

Женщине перед биопсией надо только успокоиться, никакой определенной подготовки от неё не требуется.

Проведение исследования

Взятый при биопсии или из удалённых при операции тканей молочной железы кусочек рака в пробирке с формалином (для консервации) отправляется в патоморфологическую лабораторию.

Кусочек разрезается на тончайшие пластинки, которые консервируются на очень длительный срок — несколько десятилетий, чтобы при необходимости имелся материал для анализа.

Пластинки также подвергают иммуногистохимии.

ИГХ делается двумя способами: внесённые с реактивом антигены напрямую контактируют с антителами или через антиген-посредник, который сначала ищет свое антителом, а затем этот дуэт находится вторым антигеном, концентрация которого и измеряется.

О чем говорят результаты?

1. Обнаружение в раке молочной железы рецепторов ЭР и ПР предсказывает относительно доброкачественное течение при эффективности гормональных препаратов, но в реальной жизни опухоль может не среагировать на эндокринную терапию, правда процент устойчивости невысок.

2. Обнаружение Ki-67 прогнозирует неспокойную жизнь и интенсивное лечение с использованием максимальных возможностей химиотерапии для изменения негативного прогноза болезни.

3. Рецептор НЕR2 — прогностический фактор, предлагающий сосредоточение на химиотерапии без особых надежд на антигормональное воздействие, но с другой стороны, предсказывает необходимость использование таргетного препарата, связывающего патологический белок.

Расшифровка исследования

Формально считается, что 1% ЭР уже положительно, но до 10% ЭР сомнительна надежда на значимый результат эндокринной терапии. Иммуногистохимический анализ рецепторного статуса рака молочной железы предполагает следующие ответы:

• от 0 до 2 баллов — нет гормональной зависимости;
• при 3 — 8 баллах — возможна зависимость от эндокринного воздействия, чем больше баллов, тем выше уровень рецепторов, тогда как при 3 баллах только десятая часть раковых клеток имеет рецептор.

Градации ответов при определении НЕR2:

• 0 и 1+ — нормальное содержание белка, аналогичное здоровым клеткам молочной железы и никаких мер не требует;
• 2+ — сомнительный анализ, чуть больше нормы и необходима перепроверка более точным способом, в качестве которого прибегают к FISH, дающей два варианта ответов — «есть» или «нет»;
• 3+ — явное превышение, необходима таргетная терапия для подавления излишней активности.

Белок Ki-67 констатирует:

• меньше 15% — невысокая активность пролиферации;
• 16% — 30% — умеренная агрессивность;
• выше 30% — высокая агрессия.

Определяемые при иммуногистохимии структурные элементы не гарантируют исполнения предначертанного — в процессе лечения рак изменяет свои характеристики. В нашей клинике определяют реальные характеристики злокачественного процесса в конкретный момент времени и подбирают оптимальное лечение по панели из множества генов.

Список литературы:

1. Клиническая лабораторная диагностика: национальное руководство/ Под ред. Долгова В. В., Меньшикова В. В.// — М.: ГЭОТАР-Медиа; 2012.
2. Стенина М.Б., Жукова Л.Г., Королева И.А., с соавт./ Практические рекомендации по лекарственному лечению инвазивного рака молочной железы// Злокач. Опухоли; 2016. — № 4; Спецвыпуск 2.
3. Эндокринно-чувствительные опухоли репродуктивной системы: руководство для врачей/- М: СИМК, 2014.
4. Zaha D.C. /Significance of immunohistochemistry in breast cancer// World J of Clin. Oncol.; 2014; 5(3).

Ki-67 при раке груди: зачем нужен, расшифровка результатов

Ki-67 — это маркёр пролиферативной активности опухоли (выявляется только в делящихся клетках, в периоде покоя клетки маркёр отсутствует), является раковым антигеном (белком).

Поскольку большинство злокачественных клеток находится в фазе деления, Ki-67 рассматривается как предсказывающий фактор — он определяет насколько агрессивен рост опухоли.

Тем не менее, использование Ki-67 при раке молочной железы является спорным.

Что собой представляет иммуногистохимическое исследование (ИГХ) на онкомаркер Ki-67?

Анализ на Ki-67 — это исследование биоптата ткани опухоли молочной железы, посредством окрашивания его мечеными антителами, под микроскопом. Этот анализ, который выполняет и интерпретирует врач-морфолог, позволяет определить уровень экспрессия ki-67 (антигена) злокачественными клетками.

Несмотря на то, что иммуногистохимическое исследование индекса пролиферативной активности с применением моноклональных антител к Ki-67 все чаще назначается врачами, его общая польза, особенно в том, что касается принятия решений при выборе тактики лечения рака молочной железы, не определена.

Врач назначает анализ на Ki-67 при раке молочной железы, чтобы определить индекс пролиферативной активности опухоли. Другими словами, с помощью этого анализа врач узнает, как быстро клетки рака молочной железы делятся.

В основе иммуногистохимического исследования лежит принцип взаимодействия «антиген-антитело». Ткань, в которой происходит патологический процесс, экспрессирует антигены.

При нанесении на образец ткани антител, образуется комплекс «антиген-антитело». В случае анализа на Ki-67 на образец ткани наносятся антитела под названием MIB-1.

Чем больше клеток прикрепляет к себе MIB-1, тем выше вероятность того, что опухолевые клетки будут расти и быстро делиться.

Зачем нужен Ki-67 при раке молочной железы?

ИГХ-определение индекса пролиферации при исследовании экспрессии Ki-67 (MIB-1) является независимым прогностическим признаком, определяющим клиническое течение и прогноз онкозаболевания.

То есть, с помощью этого анализа ваш врач может определить насколько агрессивен рост опухоли и ваш шанс на выздоровление.

Исследования продемонстрировали, что опухоли с более высоким уровнем Ki-67 имеют худший прогноз, чем опухоли с более низким уровнем.

Более того, исследования также показали, что опухоли с высоким уровнем Ki-67 хорошо реагирует на химиотерапевтическое лечение. По сути, чем выше процент пролиферативной активности, тем с большей вероятностью опухоль ответит на химиотерапию.

Именно поэтому некоторые очень агрессивные виды рака (такие как острый лимфоцитарный лейкоз, при котором очень быстро размножаются изменённые белые кровяные клетки) эффективно лечатся с помощью химиотерапии.

При низком уровне Ki-67 опухоль молочной железы в большей мере отреагирует на гормонотерапию.

Высокие уровни Ki-67 предопределяют хороший ответ на химиотерапию.

В настоящее время маркер Ki-67 наиболее часто используют с целью прогнозирования реакции рака молочноной железы на неоадъювантную химиотерапию.

Основная задача этого вида химиотерапевтического лечения, применяемого перед операцией, — уменьшить размеры опухоли и/или регионарных лимфатических узлов, чтобы сделать возможным проведение операции.

Как правило, «неоадъювантная химия» показана при 3А и 3Б стадиях рака молочной железы, когда опухоль распространилась на грудную стенку, кожу молочной железы, имеется обширное поражение регионарных лимфатических узлов. Эти стадии относят к так называемому местно-распространенному раку молочной железы.

Однако использование Ki-67 в качестве прогностического маркера ответа химиотерапии все еще остается спорным.

Люминальный подтип A (Luminal A) vs. Люминальный подтип B (Luminal B)

Гормон рецептор-позитивный рак молочной железы подразделяются на два молекулярных подтипа, которые имеют разные прогнозы и по-разному реагируют на лечение. Ki-67 используют в качестве дополнительного маркера при верификации этих опухолей, Хотя в настоящее время во многих клиниках предпочтение отдают другому маркеру — MCM2.

• Люминальный подтип A (частоту, с которой они встречаются 30—45 %): положительные по эстрогеновым и прогестероновым рецепторам, отрицательные по HER2 (ER+ и PR+, HER-2–), имеют индекс Ki-67 менее 14%.
• Люминальный подтип B (14—18 %): положительные по рецептору эстрогена и/или рецептору прогестерона, отрицательные по HER2 (ER+ и/или PR+, HER-2–) и имеют индекс Ki-67 более 14% или положительные по рецептору эстрогена и/или по рецептору прогестерона, положительные по HER2 (ER+ и/или PR+, HER-2+) и имеют любые значение индекса Ki-67.

Узнайте больше: Побочные эффекты химиотерапии в онкологии

Расшифровка результатов тестирования Ki-67 при раке молочной железы

В иммуногистохимической заключение вы можете увидеть следующие результаты ИГХ Ki-67, выраженные в процентах:

• Менее 10% (норма, уровень Ki-67 считается низким)
• 20% или выше (считается высоким)

«Высокий» балл означает, что опухоль молочной железы малоагрессивная (с низким потенциалом злокачественности).

Не пугайте, если в вашем иммуногистохимическом заключении вы ее найдёте Ki-67. Не все врачи доверяют этому анализу. Важно понять, что для оценки опухоли молочной железы проводят и другие анализы. Их результаты, а также ваш индекс Ki-67 могут повлиять на ваш план лечения. Другими словами, ваш врач при разработки оптимального лечения вашей опухоли использует результатов нескольких тестов.

Например, другим тестом, который применяется для оценки агрессивности рака молочной железы, является фракция S-фазы (сколько раковых клеток находится в процессе копирования своей ДНК). Этот показатель пролиферативной активности также измеряется в процентах. Значение выше 10% считается высоким.

Опять же, результат анализа Ki-67 — это всего лишь часть головоломки, поэтому старайтесь не вдаваться в подробности. Вместо этого поговорите со своим врачом о том, как лучше всего интерпретировать результаты вашего анализа и как они могут (или не могут) повлиять на ваше лечение.

Споры по поводу пользы

В медицинском сообществе не угасают дискуссии по поводу прогностической значимости фактора пролиферации Ki-67 в отношении ответа на химиотерапию при раке молочной железы.

Исследование, начатое в 2017 год, призвано решить некоторые вопросы. Предварительные данные указывают на целесообразность использования неоадъювантной химиотерапии у пациенток с Ki-67, у которых индекс превышает 20%.

Тем не менее, Ki-67 не эффективен для определения прогноза поведения опухолей, которые не реагируют на неоадъювантную химиотерапию.

Несколько слов от OncoInfo

Поиск информации в интернете или посещение онлайн-сообщество для женщины с таким же диагнозом — отличный способ получения знаний о раке молочной железы, самостоятельно разобраться в своей болезни и вариантах лечения. В этих онлайн сообществах Вы можете найти информацию о последних исследованиях в области онкологии, в том числе и по анализу ki-67.

Список использованных источников:

Иммуногистохимическая диагностика рецепторного статуса рака молочной железы (PR, ER, ki67, Her2 neu)

[12-024] Иммуногистохимическая диагностика рецепторного статуса рака молочной железы (PR, ER, ki67, Her2 neu)

12260 руб.

Стандартизованное иммуногистохимическое исследование: рецепторный статус при раке молочной железы (PR, ER, ki67, Her2 neu). Выполняется только при наличии готового микропрепарата на предметном стекле и образца ткани в парафиновом блоке.

• Синонимы русские
• ИГХ-исследование (РЭ, РП, Her2/neu, Ki-67), иммуногистохимический анализ рецепторного статуса рака молочной железы.
• Синонимы английские
• IHC (ImmunoHistoChemistry) Test for Breast Cancer Receptor Status (ER, PR, HER2, Ki67), HER2 Overexpression by IHC, Estrogen Receptors, Progesterone Receptors, ER and PR Status, Estrogen and Progesterone Receptor Status.
• Метод исследования
• Иммуногистохимический метод.
• Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Парафиновый блок с биоптатом образования молочной железы. Ткань первичной опухоли может быть получена с помощью толстоигольной биопсии, а также инцизионных и эксцизионных хирургических вмешательств. Для выявления метастазов на биопсию могут быть взяты ткани из стенки грудной клетки, регионарных лимфоузлов или отдаленных органов.

Общая информация об исследовании

Современные принципы и стратегии лечения рака молочной железы основываются, в том числе, на результатах оценки рецепторного статуса и пролиферативного потенциала опухолевых клеток.

Клетки опухоли обладают способностью вырабатывать и располагать на своей поверхности специальные белки – рецепторы, стимуляция которых приводит к запуску клеточного деления и росту опухоли. Подобные рецепторы способны связываться с веществами, присутствующими в организме в норме и исходно никак не связанными с развитием злокачественного новообразования.

Согласно актуальным клиническим рекомендациям, для рака молочной железы имеет значение наличие на опухолевых клетках следующих рецепторов, различные комбинации которых называются рецепторным статусом:

• Рецепторы к гормонам – эстрогенам и прогестерону (ER, PR). Значительная часть опухолей молочной железы является гормонально-зависимыми, то есть их рост поддерживается и стимулируется эстрогенами и прогестероном. Опухоли с положительным гормональным рецепторным статусом хорошо отвечают на терапию аналогами гормонов (тамоксифен), которые блокируют соответствующие рецепторы – связываются с ними, но не вызывают активации внутриклеточных процессов и не дают рецептору впоследствии связаться с гормоном. Таким образом, исследование продукции опухолью ER и PR позволяет определить ее чувствительность к этим препаратам.
• Рецептор второго типа к человеческому эпидермальному фактору роста (human epidermal growth factor receptor 2 – HER2/neu). В клетках некоторых опухолей молочной железы имеет место повышенная выработка данного рецепторного белка, который, соединяясь с естественным фактором роста, запускает в опухолевой клетке процесс деления. Общее число пациенток с HER2-положительным раком молочной железы составляет от 15% до 20%. Определение HER2/neu имеет не только прогностическое значение (такие опухоли обычно прогрессируют быстрее и имеют более агрессивное клиническое развитие), но и позволяет оценить возможность применения таргетных лекарственных препаратов – моноклональных антител к рецептору HER2 – трастузумаб (герцептин), лапатиниб, пертузумаб. Кроме того, HER2-позитивные опухоли резистентны к тамоксифену.

Пролиферативная активность – показатель способности опухолевых клеток к неограниченному делению, которое является основным фактором биологической агрессивности опухоли. Процесс деления сопровождается появлением в клетке определенных белков, один из которых – Ki-67.

Он не продуцируется в клетках в состоянии покоя, что позволяет использовать его как маркер пролиферативной активности опухоли.

Определение уровня Ki-67 имеет важное прогностическое значение, так как наибольшей пролиферативной активностью обладают опухоли из наименее зрелых и дифференцированных клеток.

Все указанные выше маркеры могут быть выявлены при иммуногистохимическом исследовании биоптата или операционного материала опухоли.

Для анализа из готового парафинового блока с помощью специального микроножа нарезают тончайшие срезы, которые затем прикрепляют к предметным стеклам и красят рутинными красителями, чтобы было возможно отличить клетки друг от друга и от межклеточного вещества.

Затем срезы на стеклах окрашиваются растворами антител, меченных флюоресцирующими метками, специфичных к одному из исследуемых рецепторов.

Если в опухолевой клетке присутствует искомый рецептор, антитела связываются с ним и при просмотре стекла под специальным микроскопом можно увидеть флюоресценцию, что будет свидетельствовать о положительном результате теста.

Кроме того, при просмотре среза врач-морфолог сможет увидеть, что окрашенный маркер располагается в ядре, клеточном веществе или на оболочке опухолевых клеток. Количество применяемых растворов с антителами соответствует количеству маркеров, которые исследуются в образце. Степень флюоресценции и процент клеток, в которых она есть, лежат в основе интерпретации результатов иммуногистохимического анализа и подробнее описаны в соответствующем разделе.

Для чего используется исследование?

• Для определения гормонорецепторного статуса и степени пролиферативной активности рака молочной железы для оценки прогноза и индивидуализации лечения, в том числе определения показаний для назначения таргетной терапии.
• По результатам детекции гормональных рецепторов определяется целесообразность использования антиэстрогенов, а рецептора HER2 – таргетных анти-HER2 препаратов. Выявленное отсутствие этих маркеров позволяет избежать назначения заведомо неэффективной терапии. Высокий индекс пролиферативной активности, а также негативность по рецепторному статусу по большей части являются показанием для добавления к лечению цитостатических препаратов.

Когда назначается исследование?

• При наличии гистологически верифицированного рака молочной железы — впервые выявленные, рецидивирующие и метастатические опухоли.

Что означают результаты?

При интерпретации результатов иммуногистохимического определения рецепторного статуса стероидных гормонов (эстрогенов и прогестерона) в опухолях молочной железы следует оценивать не только процент окрашенных антителами клеток, но и интенсивность окрашивания.

Оба эти параметра учитываются в шкале Allred, где процент позитивных клеток оценивается от 0 до 5 баллов, а интенсивность окрашивания от 0 до 3. Сумма двух показателей является итоговым баллом, по которому определяется позитивность опухоли по рецепторному статусу: 0-2 негативная, 3-8 позитивная.

Общий балл 3 по этой шкале соответствует 1-10% окрашенных клеток и является минимальным позитивным результатом, когда назначение гормональной терапии может иметь эффективность.

Иногда рецепторный статус определяется исключительно по проценту клеток с окрашенными ядрами. В таких случаях NCCN рекомендует считать позитивными все опухоли, где есть более 1% позитивных клеток.

При интерпретации окраски на рецептор HER2/neu учитывают только мембранное окрашивание (окрашивание клеточной оболочки), которое оценивают по шкале от 0 до +3:

• результат 0 и +1 считается HER2-негативным;
• +2 – пограничный результат, при нем по данным иммуногистохимического исследования нельзя судить о наличии на поверхности клеток рецептора HER2-neu, необходимо проведение FISH- или CISH-исследования;
• +3 – положительный результат – таргетная терапия анти-HER2 препаратами будет эффективна.

Согласно классификации St. Gallen Consensus (2009), низким индексом пролиферативной активности считается уровень Ki-67 менее 15%, средним – 16-30%, а высоким – более 30%.

Что может влиять на результат?

• Качество предоставленных парафиновых блоков, опыт и квалификация врача-патоморфолога, так как иммуногистохимический метод не в полной мере стандартизирован и оценка его результатов в некоторой степени субъективна.
• Интерпретация результатов исследования должна проводиться исключительно врачом соответствующей специальности, приведенные данные об эффективности и целесообразности назначения определенных лекарственных средств в зависимости от результатов исследования носят исключительно рекомендательный характер и могут быть пересмотрены с учетом индивидуальных особенностей пациентки.



Важные замечания

• При неопределенном HER2/neu-рецепторном статусе (результат иммуногистохимического исследования 2+) рекомендуется выполнение FISH- или CISH-исследования, которые позволят выявить гиперактивацию гена, кодирующего этот рецептор. При недоступности этих исследований допускается повторное иммуногистохимическое исследование, но на другом образце опухолевой ткани.
• Существует несколько шкал оценки рецепторного статуса рака молочной железы, в лабораторном отчете должно быть указано, по какой именно проводилась оценка позитивности опухоли в данном исследовании, а также дана описательная характеристика количества позитивных клеток, особенностей окрашивания клеточных структур и морфологических особенностей клеток.

Также рекомендуется

• Гистологическое исследование биопсийного материала образования молочной железы
• Цитологическое исследование пунктатов молочной железы
• Определение HER2 статуса опухоли методом FISH
• Определение HER2 статуса опухоли методом CISH

1. Кто назначает исследование?
2. Онколог, маммолог, онкогинеколог.
3. Литература

1. Dana Carmen Zaha. Significance of immunohistochemistry in breast cancer. World Journal of Clinical Oncology, 2014; 5(3): 382-392.

2. NCCN Clinical Practice Guidelines in Oncology: Breast Cancer. Version 3.2017 – November 10, 2017. Available at www.nccn.org.

3. Клиническая лабораторная диагностика: национальное руководство: в 2 т. – T. I / Под ред. В. В. Долгова, В. В. Меньшикова. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. С. 658-660.

4. В. Ф. Семиглазов, Р. М. Палтуев, В. В. Семиглазов, Г. А. Дашян, Т. Ю. Семиглазова, П. В. Криворотько, К. С. Николаев. Общие рекомендации по лечению раннего рака молочной железы St. Galle- 2015, адаптированные экспертами Российского общества онкомаммологов. Опухоли женской репродуктивной системы, 2015; 3: 43-60.